点击图片查看大图一、内蒙古大兴安岭林区自然环境概况
（一）地理位置
内蒙古大兴安岭林区位于我国东北部，西、西北、北与俄罗斯、蒙古隔额尔古纳河为界，东与黑龙江省相邻，南绵延至内蒙古兴安盟，地理坐标为东经119°36′26″～125°24′10″，北纬47°03′26″～53°20′00″，总面积为1067.75万hm2，森林覆被率77.6%。
由内蒙古牙克石市喜桂图生物资源开发有限公司的高级工程师连俊文担任项目负责人，成立了荷叶离褶伞人工驯化课题组。13年间，课题组结合大兴安岭地区菌类的生活习性和森林分布情况，采用林区森林枯枝落叶和腐殖质、野草作为培养基，经历了艰苦的人工驯化培育过程，终于探索出了经济、社会和生态效益都可观的荷叶离褶伞培育技术。
名 称：牙克石市喜桂图生物资源开发有限公司
地 址：牙克石市胜利办事处大桥屯十一组四组（凤凰山附近）
联系人：连俊文、段红亮
招商电话：13347180372、 13633715313 、
市场部联系人：段红亮
商务电话：13646480005
办公电话：0470-7357816
内蒙古呼伦贝尔喜桂图生物资源有限公司
公司网站：http://yksxgt.b2b.youboy.com
电子邮箱：13347180372@189.cn 邮编：022150
（二）气候
地处欧亚大陆中高纬度地带，属寒温带大陆性季风气候区。受大兴安岭山地阻隔，岭东和岭西的气候有显著差异。岭东气候温和，雨量较大，属于半湿润气候；岭西属于半湿润森林草原气候；而山地寒冷湿润，属于森林气候。林区冬季在极地大陆气团控制下，气候严寒、干燥；夏季受副热带高压的海洋气团影响，降水集中，气候温热，春季多风而干旱，秋季降温急骤，常有霜冻，无霜期较短，平均为80～115d。年平均气温-5～0℃，最冷月平均气温为-31～ -24℃，极端最低气温达-52℃，极端最高气温37.5℃。受地形和季风活动影响，降水自东向西递减，年平均降水量350~500mm。雨量、热量集中，高温日数少，日温差大，积温的有效性高；但热量不足，年际变幅大，常有夏季低温出现。林区≥0℃年积温为1,787～2,468℃，≥10℃年积温为1,235~2,014℃。
（三）地貌地势和土壤
林区地貌可分为山地、丘陵和苔原三大类型。大兴安岭主脉呈北北东－南南西走向。整体地势南高北低，主要分水岭破碎而不连贯，山顶有宽坦的山脊。林区地带性土壤主要为棕色针叶林土、黑土、暗棕壤、灰色森林土、黑钙土，在河谷、河阶台地及平缓洼地分布着草甸土和沼泽土等非地带性土壤。
（四）水文
林区属黑龙江流域，主要分布有额尔古纳河和嫩江两大水系，境内最长的河流为诺敏河，长365.1km，其次是激流河，长331.5km。河流侵蚀程度一般，河曲较明显，牛轭湖及水泡遍布。河谷平缓宽阔，其上游多沼泽化，并形成大面积湿地景观。全区河网发达，河川溪流众多，但缺乏形成湖泊的自然条件，因而湖泊较少。林区湿地面积占总面积的11%。
（五）植被
内蒙古大兴安岭林区植被以中、低山森林植被占优势，其地带性植被是以兴安落叶松林为主体的明亮针叶林，在一定地域上掺杂有一些草甸、草原草甸、沼泽、灌丛和少量人工植被。兴安落叶松是俄罗斯西伯利亚泰加林沿山地向南延伸分布的主体部分，主要分布于北部和大兴安岭主脉。在林区东南低山丘陵地带，蒙古栎林和黑桦林逐渐增多。在林区西部和南部边缘分布较多的白桦林。樟子松林在北部林区呈块状分布，在中部零星分布于向阳的斜陡坡上。在河谷冲积地上有甜杨和钻天柳混交林分布。在林区北部海拔1,200m以上为偃松矮曲林带，主要植物群落类型有岩高兰－偃松林、赤杨－偃松林；在海拔750~1,350m为针叶林或少量针阔混交林带；海拔1,000～1,350m分布着偃松－兴安落叶松林。全林区各类野生植物共有202科1951种。广茂的大兴安岭，分布着集中成片的原始森林、次生阔叶林、森林草原过渡地带，森林植被种类丰富，倒木、枯立木交错横生，腐殖质层肥厚，主要树种有兴安落叶松、樟子松（Pinus sylvestris var.mongolica）、云杉（Picea koralensis）、白桦、蒙古栎、山杨、黑桦（Betula dahurica）,河谷有钻天柳（Chosenia arbutifolia）、甜杨（Populus suaveolens）,高山之巅生长着枫桦（Betula ermanii）、岳桦（Betula armani）、散生的有榆树（Ulmus spp）,还分布极其丰富的灌丛群落，如偃松（Pinus pumila）灌丛、榛子（Corylus heterophylla）灌丛、丛桦（Betula fruticosa）灌丛等。经测算，荷叶离褶伞适宜生长环境350万公顷，主要是草类林、五花草甸、灌木丛。
（六）大型经济真菌资源
多样的森林群落类型为不同生态习性的真菌种群提供了优越的生育条件，孕育着极其丰富的大型经济真菌资源。根据《内蒙古大兴安岭大型经济真菌》记载，内蒙古大兴安岭大型经济真菌有37科87属276种，有野生食用菌、药用菌、毒菌、树木外生菌根菌、木材腐朽菌5大类。
1、食用菌资源
林区食用菌31科64属198种，占我国已知食用菌总数的20%左右。广泛分布在大兴安岭的兴安落叶松林、白桦林、樟子松林、柞树林、偃松灌丛、榛子灌丛等各种森林群落内的地上、立木、倒木上，以及伐桩、枯枝落叶、腐殖质上，以及森林草原过渡地带的草甸杂草丛中，其中利用价值大的有100多种，大部分又兼有药用价值，当地传统食用的有30余种。
白蘑科的食用菌最丰富，已知58种，其中蜜环菌、花脸香蘑、紫丁香蘑、棕灰口蘑、香杏口蘑等大型食用菌，分布广泛，产量大，是当地百姓极为喜食的大型真菌，尤其是在７～９月份，林内温度适宜时，在林内外的针阔叶树的倒木、枯立木及伐桩、枯枝落叶腐殖质层上到处可见。蒙古口蘑夏秋生于草原上，大量成群生长并形成蘑菇圈，在大兴安岭西坡森林草原过渡地带也有分布，由于采集量大和生态环境因素，数量明显减少，急需人工驯化培养；土豆口蘑多生于针阔混交林地上群生形成蘑菇圈，在人工杨树防护带上生产量大。其次还有荷叶离褶伞、真姬离褶伞、金针菇、球根口蘑、条柄铦囊蘑、棕灰口蘑等，都是味道鲜美的食用菌。
木耳科的黑木耳，野生主要集中在大兴安岭东南坡，近年来，人工栽培量极大，产量也高，成为林区主要林副产品。猴头菌科的猴头、珊瑚状猴头菌均是著名的山珍，是中国宴席上的名菜，野生数量较大，人工培养可形成规模。鸡油菌科的鸡油菌有浓郁的水果香味，并能入药。
牛肝菌科已知食用菌有19种，较为珍贵的品种有美味牛肝菌、褐庞柄牛肝菌、点柄粘盖牛肝菌、厚环粘盖牛肝菌等，不仅味道鲜美，而且多有抗癌作用，是制“舒筋丸”的主要原料之一，但是当地人因其难以贮存很少采集。
丝膜菌科已知有9种，产量较大，主要种有粘液丝膜菌、米黄丝膜菌、丁香紫丝膜菌等。
蘑菇科已知有10种，多分布在森林草原过渡地带的草地上，部分也生长在林中地上，如野蘑菇、双孢蘑菇、蘑菇、白林地蘑菇等，均是味道鲜美且质地细嫩，极有培养价值。
红菇科食用菌有17种，老百姓常称“辣蘑”的就是此科。常见食用菌有松乳菇、大白菇、花盖菇、绿菇等。
侧耳科食用菌有15种，有著名的侧耳、美味侧耳、黄白侧耳、亚侧耳、香菇、刺芹侧耳、凤尾菇等，而且部分品种已大量人工栽培。
球盖菇科食用菌已知有10种，如白鳞伞、尖鳞伞、翘鳞伞、光帽鳞伞等，其中光帽鳞伞是重要的人工栽培种，商品名称为滑菇。
2、药用菌资源
内蒙古大兴安岭森林中的药用真菌资源同野生食用菌一样丰富，有不少种类属于传统的中药或民间药物，还有很大一部分是目前筛选抗癌新药的对象。根据考察研究，本书记栽了药用真菌25科63属139种，其中已知有抗癌作用的和做抗癌试验的有109种。
多孔菌类的药用真菌有25种，如云芝、裂蹄木层孔菌、火木层孔菌、桦革裥菌、木蹄层孔菌、松生拟层孔菌等，这类分布广、产量大。
灵芝科有3种药用真菌，著名的药用真菌灵芝、松杉灵芝、树舌扁芝。
牛肝菌类的药用真菌有6种，如美味牛肝菌、点柄粘盖牛肝菌、厚环粘盖牛肝菌、褐环粘盖牛肝菌等。
白蘑科的药用菌有30种，如口蘑、金针菇、蜜环菌、紫丁香蘑等。
腹菌类药用真菌已知有10余种，如马勃科的梨形马勃、网纹马勃、大秃马勃，还有尖顶地星，分布广、产量大，主要用于消炎、止血，是中医传统用药。
猴头菌、硫磺菌、绣球菌、木耳属于食药兼用菌，具有极其广泛的研究开发价值。
3、毒菌（毒蘑菇）资源
内蒙古大兴安岭森林中的毒菌已知有16科24属42种，占全国已知毒菌种类的10%左右。红菇科的毒菌最多，已知有7种，常见有毒红菇、稀褶黑菇、臭黄菇、毛头乳菇、绒白乳菇等。鹅膏科有4种，主要有毒蝇鹅膏菌、豹斑毒鹅膏菌、灰鹅膏等。鬼伞科有墨汁鬼伞、毛头鬼伞、晶粒鬼伞等。马鞍菌科的鹿花菌为极毒菌。
4、外生菌根菌资源
相当多的真菌不仅需要森林生态环境，同时在长期历史演化过程中与树木形成共生关系，即形成树木必不可少的外生菌根菌（ectomycorrhiza fungi）。
林区记载树木外生菌根菌15科22属98种，主要是白蘑科、丝膜菌科、牛肝菌科、红菇科、蜡伞科、鹅膏科、铆钉菇科的真菌。形成菌根的真菌称菌根菌。与菌根菌形成菌根的植物称菌根植物。大兴安岭菌根植物主要有兴安落叶松、樟子松、白桦、黑桦、蒙古栎、柳树等树种。菌根是菌根菌和菌根植物的共生体，菌根能扩大植物根系的吸收面，增强根系吸叫矿物质和含氮有机物等能力，并分泌维生素、酶和抗生物质，则有利于真菌的发育和子实体的形成，还能为菌根真菌的生长提供碳源和能源，两者通过形成菌根彼此受益，对这些树木的更新生长发育以及森林生态系统的结构和功能，都有着重要的生态意义。因此对这类外生菌根菌的考察研究，不仅有益于野生食用菌、药用菌的驯化与资源保护，而且可以应用这种与树木特殊的生态关系发展林业，绿化改造秃山、荒漠，育苗造林。
5、木腐朽菌
林区有木材腐朽菌16科40属77种。木材腐朽菌是指生活在木材或活立木的死亡部分,分解吸收其养分,破坏其结构,导致木材腐朽的真菌。在自然条件下,木腐过程往往是大型真菌和小型真菌协同作用的结果。大型真菌在木腐菌中占有重要地位,其中尤以担子菌中的多孔菌种类最多，多孔菌科的迷孔菌属、牛舌菌属、层孔菌属、灵芝属、革褶菌属、干朽菌属、多孔菌属、云芝属、栓菌属等33种；革菌科的韧革菌属；白蘑科的蜜环菌属、金钱菌属；侧耳科的香菇属、侧耳属；木耳科的木耳属；银耳科的银耳属等都是重要的木材腐朽菌。这些木腐菌大多有药用价值和食用价值。这类菌广泛生长在立木、倒木、伐桩及枯枝落叶上，分解利用木质素、纤维素、半纤维素等，使树木木质部形成白色或褐色腐朽，以及导致木腐朽病。
二、荷叶离褶伞分类地位与生物学特性
（一）荷叶离褶伞分类地位
荷叶离褶伞（Lyophyllum decastes）又名“路基蘑”、“铁道蘑”、“土包蘑”、“矿地蘑”、荷叶蘑、冷菌、冻菌、一窝鸡、一窝羊等，属担子菌亚门(Basidiomycotina)，层菌纲(Hymeno-mycetes)，伞菌目(Agaricales)，白蘑科（Tricholomataceae），离褶伞属（Lyophyllum），在欧洲被称为“Fried chicken mushroom”。
（二）荷叶离褶伞形态特点
子实体中等，菌盖宽6～10cm，扁半球形，后平展，中部稍凸起或微下凹，往往不整形，盖缘下弯，薄，波状，有时不规则浅裂，盖面平滑，无毛或常有附生纤毛，有光泽，浅灰色、灰黑或淡茶褐色。菌肉中部厚，边缘薄，有弹性，白色，味柔和。菌褶直生至弯生，老后稍延生，密，幅稍宽，薄，白色至带黄色，后弯，浅灰色，褶缘波状。菌柄长6～10cm，粗0.5～1.5cm，中生或偏生，圆柱形，基部明显膨大，多数常弯生，实心，顶部粉状，向下纤维状，有弹性，白色至淡色，基部灰色至褐色。孢子印白色。孢子球形，无色，光滑，4～7µm。
（三）生长环境
夏至秋季丛生或单生于针阔混交林或杨桦林内地上，林区主要分布在河流两岸林下、森林与湿地过渡地带的林下、公路两侧萌生密林下、较为潮湿的灌木丛等。与赤松形成外生菌根。见图1～图4。
（四）分布
辽宁、吉林、黑龙江、江苏、青海、四川、贵州、云南、新疆等地。内蒙古大兴安岭分布于中部和南部，标本采于库都尔、乌尔旗汗、伊图里河。
（五）生物学特性
荷叶离褶伞菌丝生长温度范围5～30℃，最适温度18～22℃；子实体分化温度范围10～20℃；0～5℃的温差有利于子实体的分化。孢子萌发温度8～25℃；菌丝体能在PH值4～10范围内生长，适宜PH值4.5～6.5；C/N为10:1～50:1均可生长，适宜生长范围40:1～50:1；光照在20lx～1000lx之间均能生成原基，适宜光照为300lx～500lx，菌丝体能在黑暗条件下良好生长。
三、荷叶离褶伞有效成分分析及经济用途
荷叶离褶伞菌肉肥厚细腻、清香扑鼻，味道鲜美，且子实体中富含β-1,3-D葡聚糖与β-1,6-D葡聚糖，是一种食药兼用的名贵食用菌。甘肃河西学院食用菌研究所对荷叶离褶伞进行了成分测定，荷叶离褶伞子实体含粗蛋白21.4%，粗脂肪1.44%，粗纤维9.52%，碳水化合物53.03%，灰分13.6%；必需氨基酸6.02g/100g，占氨基酸总量（16.82g/100g）的35.78%；含维生素B10.068mg、维生素B24.26mg、维生素B6590μg、维生素B1255.7μg、烟酸21.2mg；1kg子实体含锌50.0mg、铜19.0mg、硒0.013mg、镉1.85mg、汞0.56mg、铅0.75mg、砷0.29mg。
荷叶离褶伞营养成分与香菇等四种食用菌比较（%）
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种 粗蛋白 粗脂肪 碳水化合物 粗纤维 灰分
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荷叶离褶伞 21.4 1.44 53.04 9.52 13.6
香菇 24.4 8.20 57.00 4.10 6.40
双孢蘑菇 21.00 4.60 31.70 21.0 8.00
糙皮侧耳 19.46 3.84 65.61 6.15 4.94
金针菇 19.34 2.22 54.00 7.42 5.97
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荷叶离褶伞子实体氨基酸种类与含量测定：荷叶离褶伞子实体中氨基酸总量（16.82g/100g）占氨基酸总量的35.78%，高于香菇（16.40g/100g）和金针菇（10.55g/100g）；必需氨基酸（6.02g/100g）占氨基酸总量的35.78%，比金针菇（4.66g/100g）高1.36g/100g;比香菇（6.69g/100g）低0.67g/100g。
荷叶离褶伞与香菇三种食用菌氨基酸含量比较（g/100g）
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氨基酸 荷叶离褶伞 香菇 金针菇
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天门氨基酸 1.75 1.57 0.68
苏氨基酸 1.09 0.80 0.53
丝氨酸 0.95 0.81 0.51
谷氨酸 2.81 3.09 1.17
甘氨酸 0.92 0.73 0.51
丙氨酸 0.99 0.86 0.89
缬氨酸 0.82 0.74 1.28
蛋氨酸 0.17 0.27 0.29
异亮氨酸 0.86 1.79 0.53
亮氨酸 1.07 1.24 0.77
酪氨酸 0.57 0.43 0.48
苯丙氨酸 0.88 0.66 0.56
赖氨酸 1.13 0.95 0.70
组氨酸 0.50 0.31 0.27
精氨酸 1.30 0.92 0.48
脯氨酸 0.84 0.70 0.42
色氨酸 ---- 0.24 ----
胱氨酸 0.17 0.34 0.48
总氨基酸 16.82 16.40 10.55
必需氨基酸 6.02 6.69 4.66
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荷叶离褶伞子实体维生素种类与含量分析：
经测定：100g荷叶离褶伞子实体中含有维生素B10.068mg、维生素B24.26 mg、维生素B6590μg、维生素B1255.7μg、烟酸21.2μg。
荷叶离褶伞子实体重金属与微量元素含量分析(mg/kg)
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镉Cd 铅Pb 砷As 汞Hg 锌Zn 铜Cu 硒Se
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荷叶离褶伞 1.85 0.75 0.29 0.56 50.0 19.0 0.013
食用菌卫生标准 2.0 1.0 0.2
绿色食品 食用菌NY/T749-2003 1.0 1.0 0.5 0.1
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1kg荷叶离褶伞子实体中含有对人体有益的锌50.0 mg、铜19.0 mg、硒0.013 mg；重金属镉的含量（1.85 mg/kg）和汞的含量（0.56 mg/kg）超过了国家《食用菌卫生标准》GB7096-2003；铅和砷的含量符合国家绿色食品食用菌NY/T749-2003的标准。
由上述测定结果得知荷叶离褶伞子实体蛋白质含量（21.4%）高，氨基酸种类齐全（17种），脂肪含量（1.44%）低，含有对人体有益的微量元素锌、铜和硒以及大量的维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、烟酸等，故该菌具有很高的营养价值。（以上材料引自《菌物学报》2008年9月15日 第27卷第5期）
河西学院生命科学与工程系对荷叶离褶伞在单因素试验的基础上，通过3因素3水平正交试验优化了荷叶离褶伞菌丝体和发酵液中多糖的提取工艺。利用圆纸片法对荷叶离褶伞多糖进行了抑菌性实验，结果表明荷叶离褶伞多糖提取物对细菌和真菌都有抑制作用，其中对四叠球菌和黑曲霉的抑制作用最强，最小抑菌浓度均为1．094ug／ml。该研究以期为荷叶离褶伞在更多领域的合理开和利用提供参考。（《中国食品工业》）2009年第12期
四、荷叶离褶伞人工驯化培育技术指标
（一）母种的制作
每年8月～9月，在大兴安岭林区采集野生荷叶离褶伞子实体，进行试验母种分离和提纯、驯化。
1、选取朵型好、菌柄粗壮、菌盖厚实的多个子实体，通过组织分离，分别进行PDA培养基试管培养。试验共分离菌种拟定12个，每个菌株分离20～30支，温箱培养72小时进行观察。并从中选取菌丝成活、外观优良、无杂菌感染的菌株 6个，分别定名为Za、Zb、Zc、Zd、Zo、Zx进行菌种母种生长综合性状的选育。对照PDA培养基试验。
2分别从上述的6个菌株进行改良PDA培养基试管培养，经观察72小时发现La、Lb、Lc、 Ld菌丝生长健壮但生长缓慢, 经过168小时培养，生长1.0㎝、0.6㎝、0.8㎝、0.8 cm，Lo、Lx生长较迅速，超过1cm。可以看出：PDA培养基不太适合野生荷叶离褶伞菌丝的生长。但在PDA培养基上可以成活。
3、进行荷叶离褶伞菌丝母种培养基的选择
为了筛选一种比较适合荷叶离褶伞菌丝生长的母种培养基配方，我们选取了以下10种材料分别进行同一种菌种菌丝的生长速度测试实验，一级菌使用长度为18mm×180 mm长的玻璃试管培养，温度控制在18～25℃，适宜温度22℃，培养时间20天，以便进行观察总结。分别是：
（1）马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18g、麦麸40g、水1000ml
（2）马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18g、小米40g、水1000ml
（3）马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18g、玉米碴子40g、水1000ml
（4）马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18g、大米40g、水1000ml
（5）马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18g、蛋白胨3g、水1000ml
（6）马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18g、磷酸二氢钾2g、水1000ml
（7）马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18g、豆饼粉10g、水1000ml
（8）马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18g、小麦20g、水1000ml
（9）马铃薯200g、琼脂18g、阔叶树落叶100g、水1000ml取汁
（10）阔叶树锯末200g、马铃薯200g、琼脂18g、水1000ml
马铃薯去皮、挖眼，切片。麦麸、小米、玉米碴子、大米、豆饼、阔叶树落叶、阔叶树锯末分别煮汁、过滤、沉淀，取上层液。分别装管、灭菌后，统一接入荷叶离褶伞组织分离的菌株,放入恒温箱中，25℃培养96小时。发现菌丝在配方9、10、1三个样方生长良好。分别是1.0㎝、0.8㎝、0.6㎝，尤其配方9的长势优良，菌丝粗壮，生长端整齐，浓密，在试管的中心上下两端生长均匀，配方9的原料基础适合荷叶离褶伞菌丝的生长。
为了找出最佳比例配方，我们对配方9的各种原料比例进行配方比较，调整比例。分别是：
（1）马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18g、阔叶树落叶100g、水1000ml。
（2）铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18g、阔叶树落叶200g、水1000ml。
(3)马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18g、阔叶树落叶400g、水1000ml
制作方式与上述相同，分别接入分离菌株，96小时培养后，检查测量发现，配方2生长最佳。得出结论是，荷叶离褶伞菌丝在阔叶树落叶在每1000ml培养基中的含量为200g时生长最佳。基本是14天左右可以长满试管约11cm左右的长度。故此，我们定为此培养基为培养基，阔叶树落叶以大兴安岭原生产地的为好，开锅后慢火煮5～10分钟为佳。
对筛选出的6个菌株同时接到阔叶树落叶培养基上。25℃恒温培养，发现 La、Lb、Lc、约需18天可以长满试管，Ld约需15天可以长满试管，Lo、Lx约需22天可以长满试管。出现菌丝生长性状不一的原因，目前还没有明确的分析。初步推断是菌种对人工的培养还是有一定的抗性的，对养分的需求有不同的差别和要求，必须经过有针对性的野外培养方可得出结论。图5～图6。
（二）荷叶离褶伞二级菌种的制作
从荷叶离褶伞母种的分离可以看出，在一般情况下分解纤维素和木质素的能力都不强。针对这一特点，结合大兴安岭地区野生荷叶离褶伞生活习性和森林分布情况，我们分别选择锯末、小麦、大麦和阔叶树落叶作为培养基的原料，生产菌种。分别是：
（1）锯末80%、麦麸18%、石膏粉1%。
（2）小麦80%，锯沫19%，石膏粉1%
（3）大麦80%、锯沫19%、石膏粉1%
（4）阔叶树枯枝落叶80%，麦麸18%、石膏粉1%、葡萄糖1%、水适量。
(5)玉米大碴子或麦粒50㎏(86.2%)，阔叶树种枯枝落叶（或草）粉8㎏(13.8%)，石膏58g。
制作过程是：将小麦、大麦分别煮到熟而不烂，大麦、小麦以内无白心但不开裂为止，麦麸、锯沫、石膏粉等分别用水拌好后混于相应的原料中拌均匀，装500ml三角瓶和装二级菌葡萄糖瓶中，灭菌、接种，室内培养。期间，需检查菌种的感染情况，剔除感染袋。养菌阶段发现，荷叶离褶伞菌丝在配方4、5上生长迅速，经过40-42天即可长满全瓶，小麦、玉米碴子相似，需55天方可长满全瓶。锯沫生长约经过60～65天方可满瓶。
配方5培养基配方制作方法：将玉米大碴子浸泡12小时以上，用水煮至熟而不烂，用清水透洗沥净粘液，再与树叶粉及石膏拌匀装瓶，常压或高压灭菌，无菌条件下接种，上架培养。发菌期间采取两次摇瓶法，菌丝长满瓶时间可缩短10～15天，菌龄短，菌丝齐整，活性强。菌丝发满瓶时间为30天左右。
二级菌以颗粒、尤其以阔叶树枯枝落叶为主料生长迅速，是做菌种的良好材料。以玉米碴子、小麦作原料也可以，但是在制作和养菌过程中，容易出现杂菌感染情况，尤其新手制作菌种，火候和技术掌握有一定难度，容易增加生产成本。配方4、5的技术简单感染率低，所用原料为大兴安岭地区资源最为丰富的枯枝落叶，可以在大兴安岭地区推广。图7～10
（三）三级菌种的制作
使用林区针叶林和阔叶林等林下枯枝落叶、腐殖质、阔叶木屑、林下及草甸子上的野草和麦麸按照一定比例配方：枯枝落叶（阔叶树种）60%，野草20%，麦麸、腐质土等20%。
三级菌种培养基制作方法：将各种原料拌匀，使含水量达62%为宜，一般选用17×34cm的丙烯袋，每袋装干料约500g。常压或高压灭菌，无菌条件下接种，上架发菌培养。图11
（四）荷叶离褶伞人工驯化出菇培育技术指标
出菇驯化培育分4种模式，野外林下或灌丛2种，室内或菇棚2种。野外林下出菇模式最大的优点是可以大面积推广，与林地形成菌根关系，对森林培育有很大益处，其弊端是一年只能在6～9月份生产；室内或菇棚培育模式最大优点是一年四季均可培育，就是需要较大面积建设菇棚或培养室，成本比较高。
1、荷叶离褶伞野外林下出菇
在草类兴安落叶松林、草类白桦林下和杂草甸(五花草甸)设置野外培育地，培养地要选择平坦，土壤为棕色针叶林土，土壤厚度在40㎝以上。在林间或草甸开出深30～40㎝、宽40㎝、长300～400㎝（长度控制在便于管理）的沟渠，在沟两侧立面上打穴，把三级菌脱袋后成3～5㎝直径大小的团粒，平铺在沟渠地面，把三级菌袋一半埋在立面穴内，覆盖腐殖质土3～4㎝，再覆盖2～4㎝的枯枝落叶或者营养料。大兴安岭林区6～8月林地温度一般为10～28℃，该菌丝体适应5～30℃，子实体适应8～20℃。培养基适宜含水量为62%，子实体的适宜空气湿度85%～90%。菌丝对光线的要求不太严格，林下的自然散射光即可。喜新鲜空气，森林空气是食用菌最佳空气环境。适时适量浇水，通风，天热时要加盖草帘降温。夏秋季节20天左右就可采收成菇。采收标准国家还没有标准，按照食用菌商业惯例，出菇以菇伞似开非开时为度。
野外培育时间在20天～30天，第一茬菇开始生长人，出菇时间一般在3～4天完成，当荷叶离褶伞高5～8㎝，菌伞没有展开时，可以采第一茬菇，采菇时要将开闪的蘑菇均匀留下，作为菌种发散孢子粉的母种，采摘第一茬菇后，在培育床上覆盖2～4㎝的营养土，以利菌丝继续生长。按照大兴安岭气候环境条件，野外培育荷叶离褶伞每年可以出菇3～4茬，每平方米可累积产菇10～15㎏。
特点：荷叶离褶伞的野外种植，在原生长环境下进行野外培育出菇，利用森林环境扩大培育面积，增加食用菌产量的生产方式。在森林生态环境生长发育与树木形成共生关系，形成树木必不可少的外生菌根菌。菌根植物主要有兴安落叶松、樟子松、白桦、黑桦、蒙古栎、柳树等树种。菌根是菌根菌和菌根植物的共生体，菌根能扩大植物根系的吸收面，增强根系吸收矿物质和含氮有机物等能力，并分泌维生素、酶和抗生物质，则有利于真菌的发育和子实体的形成，还能为菌根真菌的生长提供碳源和能源，两者通过形成菌根彼此受益，对这些树木的更新生长发育以及森林生态系统的结构和功能，都有着重要的生态意义。图19～21。
2、灌木丛（或草甸）打穴栽培法
培育环境选择：林区适宜驯化培育荷叶离褶伞的灌木丛有丛桦灌丛、榛子灌丛,草甸有五花草甸，苔草草甸等。
使用专用工具在灌木层中打穴，穴位大小以空地大小及打穴难易程度而定，一般每个穴位下种1～6袋。调整好穴内的土壤水分达40%,将脱袋后的菌柱整个掩埋于穴内，覆上2～4cm的腐质土及1～2cm的树叶，把塑料膜做成的锥形帽扣在穴面上。出菇前期每2～3天揭帽检查其内湿度，酌情结合雨水浇水，后期要每天揭盖检查适当浇水。自然温度及气候下一般20天左右现蕾出菇，出菇周期等与槽式栽培法相近。一般每市亩下种3000袋左右，产量按下种量计算，一般每袋菌种年可产鲜菇1.5市斤，头潮0.8斤，二潮0.5斤，三潮0.2斤，次年还可产0.5斤。
此培育方法生物学效率达150%～200%（与槽式栽培法基本一致），投入产出比约为1:5（与室内箱架式栽培法基本一致）。图22
3、室（大棚）内箱架式栽培荷叶离褶伞
(1)菇棚设置
菇棚以坐北朝南为好，一般宽为5～6m，长不等，面积50～100㎡为宜。墙壁要有窗户或做成拱形棚顶，用透明塑料膜覆盖，以便采光。南北墙上对应培养架的过道要开上中下通风孔，规格40×40cm，孔的一端装纱窗，另一端设阀门。上孔距墙壁上沿20cm，下孔距地10cm，孔的东西间距一般为2.5m。棚顶长中线上每隔4m设拔风孔一个，筒高1.5m、径30cm，筒顶设防雨帽，中间装阀门。
（2）培养架设置
培养架一般为木质材料，在菇棚内设置4～6层培养架，每层间距50cm，在培养架上放置培养箱，培养箱底宽1～1.2m，长2～2.5m，箱高30cm。培养箱与菇棚南北墙呈垂直并列摆放，每排培养架间距60cm，培养架的一端与墙间留走廊宽60～80cm。
（3）栽培袋的处理
用高锰酸钾或克霉灵溶液清洗袋的外表。
菌袋开口：剪掉菌袋盖体，保留菌种以上筒膜5cm。
搔菌：清除菌柱上端的老菌皮.
覆盖：搔菌后马上覆盖含水40%的腐质土2～4cm，再覆盖1～2cm的树叶（落叶松针叶为好）。
将处理好的栽培袋按每㎡50袋的密度垂直摆放于箱床内，之后用塑料膜覆盖于箱床上。
（4）菇棚的管理
每天揭开塑料膜观察菌袋及箱床内的干湿状态，适时通风浇水，使箱内保持湿润状态。保持室内空气新鲜，并维持室温15～20℃。依棚内昼夜自然光线照射，约20天即可现蕾出菇，再需15～20天便可采收头潮商品菇。头潮菇采收结束后，停止浇水养菌3～5天，然后再逐渐浇水使箱床内达到湿润状态，又经15～20天可采收第二潮菇。二潮菇后弃掉菌袋，完成第一个批次栽培周期（约60～70天），接着可换载第二批次。如此，每个菇棚每年可重复栽培5～6个批次。菇棚内要始终清洁卫生，保证空气流通新鲜，以减免病虫害的发生。必要时可采用国家允许的药物杀虫灭菌，最好采用安装物理净化装置净化空气，如负离子净化器、氧原子消毒机等。图12～15
4、 室内箱槽式栽培荷叶离褶伞
用木板或藤条制作宽50 cm、长80cm、高30cm的小箱槽，木板制作的箱槽底面及四周打小孔。把脱袋后的菌柱立着摆放于槽内，用含水40%的腐质土掩埋，菌柱的上面覆土2～4cm，覆树叶1～2cm，然后覆盖塑料膜，将箱槽摆放于床架上。每个箱槽可下种24个菌柱，可采菇三茬，即28斤左右。出过三茬菇后重新换土换菌播种。其余管理同室内箱架式袋栽模式。
此模式培育荷叶离褶伞生物学效率可达120%，投入产出比约为1:4（成本2.5元/袋，产值10元/袋）。图16～18
五、荷叶离褶伞人工驯化培育经济指标
（一）室内培养箱式栽培经济指标
1、菇棚面积分配：箱床架占菇棚地表总面积的60%，其余40%为作业道占用。有效出菇面积为地表总面积的300%（5层架×60%）
2、栽培密度：每㎡培养箱架可垂直摆放50袋。
3、菇棚周转使用率：每年可周转栽培5～6个批次（每个批次周期为60天左右）
4、市场预测：目前市场野生荷叶离褶伞鲜菇价位在15～20元/市斤，干菇市场价180～300元/市斤，人工培养按照市场价10元/斤。
单位产出：
每袋可产鲜菇500克， 产值10元。
每㎡培养箱每批可产鲜菇50斤，产值500 元。
每㎡菇房每年可产鲜菇250斤，产值2500元。
5、单位成本
每袋总成本2.5元/袋（菌种及出菇管理）；
每㎡培养箱每批投入总成本125元；
每㎡菇房每年投入生产总成本625元；
投入产出比 1:4；
生物转换率 100%；
（二）野外林下种植栽培经济指标
1、有效种植面积测算：此模式不单是沟底下种，而且沟墙两侧的腐质层各有20cm宽的墙面上也同时播种，这就在不增加地表总面积的前提下充分扩大了下种面积。沟底面积（宽70cm）占地表总面积的44.4%，沟两侧菌墙占地表总面积的25.4%，实际下种面积约占地表总面积的70%。
2、栽培区作业道宽80cm，占地表总面积的50%。
3、四周排水沟占地表总面积的5%。
4、每市亩下种量：折合4200袋。每㎡有效面积36个点位（相当于下种9袋）
5、生物学效率150%～200%：即当年头潮菇80%、二潮菇50%、三潮菇20%、次年50%。
6、市亩年产出：当年可产鲜菇6300斤，产值63000元；次年可产鲜菇1100斤、产值11000元。
7、市亩成本
当年菌种成本10500元，人工费及其他费用2000元，计12500元。次年田间管理及后续培育营养肥料 2300元。合计：14800元
8、投入产出比
当年投入产出比1:5.04
次年投入产出比1:4.8
两年综合投入产出比1:4.9
9、年市亩税前利润
当年市亩利润 50500元
次年市亩利润8700元
两年合计 59200元
平均每年 29600元
六、荷叶离褶伞人工驯化培育效益分析
（一）生态效益
保护野生资源，以利用野生资源转向利用人工培育资源，扩大后备资源蕴藏量。保护濒危物种，有利于野生珍贵食用菌的恢复和发展。将人为对野生食用菌的干扰和影响程度降到最小，保护现有原始所有物种、基因和各种生境，实现生态系统的完整性、连续性及生物多样性。对森林培育的生态角度来讲，荷叶离褶伞是一种草腐生菌种，把野生菌种培育到林地或草地，与树根或草根形成共生关系，大面积地扩大了草根和树根部的营养吸收面，有利于树木的生长，对造林绿化、森林培育具有积极作用，特别值得一提的是此类食用菌在林区有350余万公顷的分布区域，如果形成规模培育，可以大大提高林地生产力。在野外培育过程中，把森林的枯枝落叶快熟分解，降低森林枯枝落叶的富集，对森林防火具有积极意义，这是一个新的课题，待今后研究探讨。
（二）社会效益
是科学技术是第一生产力的最佳体现，是科学技术创新与自然资源的完美结合，转变传统林业经营理念，是林区产业结构调整改的积极突破，是转变产业结构的首选项目，同时在生态优先教育中起到积极作用。通过野生食用菌科学培育，发展集约化、规模化经营，实现品牌效益。培养职业技术人才、增加职工工资收入、安排富余劳动力、拓宽产业渠道、维护林区稳定、创造拥有核心产业技术等方面都有积极意义。如果将此项目在林区推广，可成为寒温带地区珍稀食用菌种源培育基地，科研教学实验示范基地，通过与国内、外学术的交流，可以提高管理干部、专业人员的业务素质，可以带动区域经济的繁荣，提供更多的就业机会。可以积累大量全面可靠的基础资料，有利于探索森林资源可持续经营途径，必将在实现区域社会经济与生态环境协调发展方面发挥其应有的价值。
(三)经济价值
从经济价值方面讲，荷叶离褶伞的培养基原料为林下枯枝落叶，大大降低了林木消耗，是绿色利用、低碳循环经济，而且荷叶离褶伞一旦在林下或草地培育，次年可在土壤里自然繁殖，在林下、草地、农田都可形成长期菌种，不需要象木耳那样每年做菌种，可以大量减少森林资源消耗，充分利用森林枯枝落叶及林地腐殖质，荷叶离褶伞人工驯化培育实现了生态价值和经济价值的完美结合，非常适合在林区大规模养殖，一旦形成规模养殖，不但有利于生态保护，经济效益也十分客观。在人工培育下，荷叶离褶伞每年可以采3至4茬，每年每㎡菇房每年投入生产总成本625元，每年每㎡产值是2500元；市亩年成本14800元，每年每市亩税前利润29600元。按长期效益来算，在1平方米土地上，培育荷叶离褶伞单位面积所创造的经济效益可达到人工培育木耳的40倍以上。通过本技术成果推广以及基地示范作用和宣传作用，扩大大兴安岭知名度，实现招商引资，利用外资实现金资链的延伸。变资源优势为产品优势、经济优势，形成核心技术、创新产业、提升森林资源的市场价值和竞争力。变输血为造血，充分发挥当地资源优势，提高森林综合效益，提高土地生产力。
七、综合评价
1、本项目是立足于林区自然环境、森林资源、野生食用菌分布、产业方向等实际情况出发，完全能够形成驯化培育技术标准，与现在林区食用菌生产相比，技术上和产业规模上都有新的突破，能够充分利用原始森林生态环境，延长了培养基的生命，扩大了单位体积的培养基在出菇面积，极大的提高森林的生产力，同样提高了食用菌产量。
2、从市场需求和人们对原生态食品的追求方面有了极大的提高，培育地区优势种，而且在野生环境下培育食用菌，保持了生态食品的原有风味和营养，实现了真正的原生态。现在国内外野生食用菌产品市场需求量大，需求大于供应，平均价格是木耳的2～5倍，是森林生态旅游产业的极大促进，使旅游业有了产业支撑，并能形成地区特色产品。
3、能形成核心技术、优势产业、规模经济、集团型产业。经过多年的调查研究论证，适合本类食用菌生长发育的森林环境面积350余万公顷，如果利用交通便利，能实行林间出菇管理的适宜森林群落类型，如草类---白桦林、草类---落叶松林、草类---白桦落叶松林、草甸、庭院等，以及林间空地，不破坏森林植被，并能为森林快速提供营养成分，是培育森林和培育生产食用菌一举两得的发展项目。
4、从种源研究和更新换代来讲，可以脱离一味的引进外地品种，由于外地品种在培育生产工程中，受时间、气候环境和不能及时更新换代等方面的影响，过早地出现了稳定性退化、衰老、产量低、易被病虫害感染等现象。研究开发本地优势品种，可以摆脱步人后尘、被人牵着鼻子走的历史，可以自主创新技术。
5、充分利用林区固定资产、劳动力、自然资源等各种资源，提高资源的利用率。基建工程完全可以利用现有闲置厂房、学校、库房进行改造维护使用。
6、有形成规模经济的发展前景，有扩大劳动市场的潜力，可以安置大批林区劳动力。
本成果技术完善，在国内还没有相关野外荷叶离褶伞人工培育，属于技术独创，是大兴安岭寒温带地区新型产业的代表，是发挥大兴安岭林区资源优势，扩大规模产业，积极适应市场需求，安排富裕劳动力等方面具有现实意义。
